石鲫，主要分布于我国长江中下游干流及湖泊中。石鲫体形小，肉质细嫩、味道鲜美，具有很高的经济价值。上海市水产研究所于2015年成功进行了石鲫的规模化人工繁育，目前尚无针对石鲫养殖的配合饲料。本试验通过分析饲料中不同蛋白质水平对石鲫鱼种生长、存活、常规生化组成及生理代谢的影响，探究其配合饲料中最适蛋白质水平。

一、材料和方法

1.饲料配方与制备

试验配制5组饲料，使饲料中蛋白质水平分别为28.13%、34.18%、37.34%、42.09%和45.20%(记为A1～A5组)。饲料原料粉碎后过80目筛网，并逐级混合，随后加入25%蒸馏水混合，并用制粒机制备饲料(粒径3毫米、长度10毫米)。将制备好的饲料在室温下风干并保存于-20℃冰箱中备用，试验饲料配方及饲料常规生化组成见表1。

2.试验设计与养殖管理

本试验采用15个玻璃缸(长、宽、高为40厘米×60厘米×60厘米)进行石鲫养殖试验。为降低应激反应，试验前随机选择500尾活力良好的石鲫(个体重40克左右)在玻璃缸中暂养3～5天，并进一步选择活力较好的个体用于养殖试验。各饲料组设定3个平行玻璃缸，每个玻璃缸放20尾个体。每天定时投喂1次，按照石鲫体重的3%投喂试验饲料，每天虹吸清除粪便和残饵。试验用水为消毒沉淀后的河道水，养殖试验过程中玻璃缸水深保持在50厘米左右，玻璃缸中水体的循环速度为3升/分。所有玻璃缸均每天24小时连续曝气以保持养殖水体溶氧＞5毫克/升。试验过程中每天测定水质，并将水质维持在较佳范围内(pH 7～8.5，氨氮＜0.4毫克/升，亚硝酸盐＜0.05毫克/升)。

3.生长数据收集及样本采集

养殖试验100天后捞出每个玻璃缸中所有的试验鱼，并对其计数称重，据此计算各玻璃缸中石鲫增重率和成活率。根据饵料投喂量、试验鱼初重及终重计算饲料系数。从每个玻璃缸中随机选择6尾石鲫，从每尾石鲫腹部抽取2毫升左右血淋巴放于2毫升离心管中，随后-80℃冷冻保存，用于酶活测定。解剖石鲫获得试验鱼背部肌肉，在组织捣碎机中搅拌成肉糜，混匀后置于-20℃冰箱保存，用于后续生化分析。

4.样品分析

解冻血淋巴样品，使用IKA微型匀浆器匀浆，将匀浆液在10000转/分、4℃条件 下离心20分钟，收集离心后上清液并保存于-40℃冰箱中以备后续使用。使用分光光度计和相应的试验试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定血淋巴中的淀粉酶、蛋白质酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)水平。根据AOAC的方法对试验饲料的水分、粗蛋白质和灰分水平进行测定，根据Folch等(1957)的方法用氯仿－甲醇(2∶1，体积比)提取总脂。

5.统计分析

使用SPSS 19.0软件进行统计分析，取P＜0.05为差异显著。数据表示为“平均 值±标准误”。

二、结果及分析

1.养殖性能

各饲料组石鲫的初始体重均为42克/尾左右，经100天养殖，各饲料组石鲫的平均体重增加(160～230克/尾)，增重率为278.44%～439.37%，其中37.34%蛋白质水平组石鲫的增重率最高，为439.37%。各饲料组饵料系数随着饲料中蛋白质水平的提高呈先降低、后升高的变化趋势，其中42.09%蛋白质水平组石鲫饵料系数最低，仅为1.5。饲料蛋白质效率随着饲料中蛋白质水平的提高呈先升、后降的变化趋势，并且当饲料中蛋白质水平为37.34%时饲料的蛋白质效率最高，为1.78%。各饲料组石鲫成活率无明显差异，均为96%左右。

2.生理指标

石鲫血淋巴中淀粉酶的水平随着饲料中蛋白质水平的提高而呈先明显下降、后缓慢升高变化，并且A3～A5组个体的淀粉酶水平显著低于另外两组(P＜0.05)。与之相反，石鲫血淋巴中蛋白质酶的水平随着饲料中蛋白质水平的提高而呈明显的升高趋势，其中A3～A5组个体的蛋白质酶水平显著升高(P＜0.05)。石鲫血淋巴中SOD、AKP及ACP活性均随着饲料中蛋白质水平的提高而呈“先升高、后降低”的变化趋势，且当蛋白质水平为37.34%～42.09%时相关酶的活性较高。与之相反，石鲫血淋巴中MDA水平随着饲料中蛋白质水平的提高而呈“先降低、后升高”的变化趋势，且当饲料中蛋白质水平为42.09%时MDA含量显著降低(P＜0.05)。

3.生化组成试验

结果表明，石鲫肌肉中粗蛋白质及灰分水平随着饲料中蛋白质水平的提高呈平稳增加趋势；与之相反，肌肉中干物质及总脂水平随着饲料中蛋白质水平的提高呈明显降低趋势，其中42.09%和45.20%蛋白质水平组石鲫总脂水平显著低于其余3组(P＜0.05)。

三、讨论

1.饲料中不同蛋白质水平对石鲫养殖性能的影响

目前石鲫尚无专门饲料用于养殖，通常使用鲫鱼配合饲料代替。本试验中石鲫的生长性能随着饲料中蛋白质水平由28.13%增加至37.34%而逐渐提高，随着饲料中蛋白质水平由42.09%增至45.20%而降低，这表明石鲫保持最佳生长性能所需的饲粮蛋白质水平为37.34%～42.09%。本研究中蛋白质效率随着饲料中蛋白质水平的提高同样呈先升、后降的变化趋势，并且当饲料中蛋白质水平为37.34%时蛋白质效率最高(1.78%)，该结果表明饲料中蛋白质水平为37.34%可以在保障石鲫生长性能的情况下降低饲料成本。

2.饲料中不同蛋白质水平对石鲫生理代谢的影响

石鲫血淋巴中淀粉酶水平随着饲料中蛋白质水平由28.13%提高至37.34%而逐渐降低，蛋白质酶水平随着饲料中蛋白质水平的提高而逐渐升高，这表明石鲫可以通过改变体内消化酶的活性，以改变对饲料中不同物质的消化吸收。石鲫可以通过提高体内蛋白质酶水平，加强对饲料中蛋白质的消化吸收。蛋白质酶活性与饲料中蛋白质性质和水平密切相关，同时这种关系可以用来衡量试验个体对饲料蛋白质的利用率。当饲料中蛋白质水平为37.34%～42.09%时，SOD、AKP及ACP活性较高，表明一定量的蛋白质营养会为免疫及抗氧化酶合成提供重要的物质基础，因此动物机体的非特异性免疫性能与饲料中蛋白质水平有关。MDA是一种脂质过氧化物的代谢产物，通常被用作氧化应激中细胞膜氧化损伤的评价指标。在本试验中，MDA含量随着饲料中蛋白质水平的提高呈现“先降低、后升高”的变化趋势。由此表明当饲料中蛋白质水平超过一定比例时，会使机体受到胁迫，致使MDA发生积累并造成氧化损伤。因此，通过人为控制饲料中蛋白质水平可以提高养殖对象的免疫抗氧化性能。在石鲫养殖中饲料蛋白质水平为42.09%组效果最佳。

3.饲料中不同蛋白质水平对石鲫生化组成的影响

石鲫肌肉中粗蛋白质水平随着饲料中蛋白质水平的提高先持续增加、后保持稳定，表明饲料中的蛋白质会在养殖对象体内积累，但积累到一定量后会达到平衡状态。本试验中石鲫肌肉灰分水平虽然呈增加趋势，但各组间无显著差异，表明肌肉中灰分水平受饲料中蛋白质水平影响较小。本试验中肌肉总脂水平随着饲料中蛋白质水平的提高呈明显的降低趋势，表明过高的饲料蛋白质水平可能会降低摄食对象对脂肪的利用率，从而减少脂肪在体内积累。综合考虑成本、生长性能、生理代谢等因素，建议石鲫鱼种配合饲料中适宜蛋白质水平为38%左右。由于水产动物对饲料中蛋白质的需求受到年龄、放养密度、蛋白质来源及养殖环境等因素的影响，因此有必要进一步开展不同养殖阶段石鲫对蛋白质的需求相关研究。